MKN-45 人胃癌細(xì)胞

細(xì)胞具體情況介紹：

細(xì)胞名稱                       MKN-45 人胃癌細(xì)胞

來源                             DSMZ 細(xì)胞庫

種屬                             人

組織                             胃

生長特性                       貼壁

建議使用培養(yǎng)基

成瘤情況                       未成瘤

龍躍細(xì)胞庫簡介：

我公司自有高品質(zhì)進(jìn)口來源細(xì)胞庫， 所有細(xì)胞來源為進(jìn)口母細(xì)胞， 經(jīng)過永生化處理制成傳代細(xì)胞株， 保證為國內(nèi)高品質(zhì)傳代細(xì)胞株。

另外我們有專門的工程師負(fù)責(zé)售后維護(hù)工作， 保證您購買細(xì)胞沒有后顧之憂，  如果對(duì)細(xì)胞品質(zhì)不滿意可以無條件退款或免費(fèi)重新發(fā)貨，直到滿意為止。

 細(xì)胞處理方法

以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。

一．貼壁細(xì)胞

1. 客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
4. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
5. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
7. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO₂  培養(yǎng)。

二．懸浮細(xì)胞

1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。

2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。

3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。

5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO₂  培養(yǎng)

維修 PCR/酶標(biāo)儀/所有實(shí)驗(yàn)室儀器

我公司維修站目前國內(nèi)有上海和北京兩個(gè)站點(diǎn)  （ 北京和上海可以派專人上門檢測儀器并運(yùn)往維修站， 也可以發(fā)快遞我公司 ）， 免費(fèi)檢查，  找到問題后報(bào)價(jià)維修， 如果報(bào)價(jià)后您覺得價(jià)格高的話可以不修（我們負(fù)責(zé)把機(jī)器原樣寄回）

實(shí)驗(yàn)室儀器維修， 包括PCR， 酶標(biāo)儀， 離心機(jī)，分析儀器，天平，水分計(jì)等

從事維修工作的工程師有長達(dá)20年的工作經(jīng)驗(yàn)，  可勝任幾乎所有常規(guī)實(shí)驗(yàn)室儀器的維修及校準(zhǔn)等工作， 大熒光定量PCR， DNA測序儀，小到水分計(jì)都可以維修

細(xì)胞培養(yǎng)小課堂 

細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)模克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù)，通過細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞，又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長增殖等。

營養(yǎng)條件

1．培養(yǎng)基

細(xì)胞培養(yǎng)基包含細(xì)胞生長所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)，包括碳水化合物、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等。針對(duì)不同細(xì)胞的營養(yǎng)需求，有多種合成培養(yǎng)基可供選擇，如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。

2．其他添加成分

在各種合成培養(yǎng)基提供基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)之外，還需根據(jù)不同細(xì)胞和不同的培養(yǎng)目的添加其他成分，如血清、因子等。

血清提供的是細(xì)胞外基質(zhì)、生長因子和轉(zhuǎn)鐵蛋白等重要物質(zhì)，常用的是胎牛血清。要根據(jù)不同的細(xì)胞和不同的研究目的決定添加血清的比例。10%～20%的血清能維持細(xì)胞較快的生長增殖速度，稱為生長培養(yǎng)液；為維持細(xì)胞緩慢生長或不死，添加2%～5%的血清即可，稱為維持培養(yǎng)液。但血清中也存在有害于細(xì)胞生長和繁殖的物質(zhì)，如補(bǔ)體、免疫球蛋白和一些生長抑制因子；成分不明確，影響對(duì)結(jié)果的分析；不同動(dòng)物、不同批次的血清活性差別較大，影響培養(yǎng)效果的穩(wěn)定性。

谷氨酰胺是細(xì)胞生長重要的氮源，在細(xì)胞生長代謝過程中起重要作用，但由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定容易降解，4℃下放置7天即可分解約50%，故谷氨酰胺需在使用前添加。

為防止污染，培養(yǎng)基中還需添加一定量的抗生素，常用抗生素名稱、濃度及敏感性如下表。 ^[1]